光合细菌在防治根肿病中的应用及根肿病防治剂的制备方法

【摘要】本发明提供了光合细菌在防治根肿病中的应用及防治根肿病的药剂。在具体应用中，将光合细菌用水配制成1~2×108 cfu/mL的菌悬液。在将芥菜苗移栽到田间栽培之前，将芥菜苗的根部剪掉。按照每100mL菌悬液处理10～20株芥菜苗的方法，将截断的芥菜苗浸根处理30～60min；芥菜根肿病防治剂的成分包括沼泽红假单胞菌光合细菌，而沼泽红假单胞菌的光合细菌是防治芥菜根肿的主要活性成分。试验结果证明，采用本发明的具体施用方法将光合细菌施用于幼苗，可使蔬菜生长率提高16.5%，根肿病病害指数提高27. 收获时。1%，根肿病控制率达到35%。收获时。1%，根肿病控制率达到35%。收获时。1%，根肿病控制率达到35%。

【专利说明】

光合细菌在根肿病防治中的应用及根肿病防治剂

技术领域

本发明属于根肿病防治技术领域，具体涉及光合细菌在根肿病防治中的应用及根肿病防治药剂。

【背景技术】

[0002]“涪陵榨菜”已成为我国重庆特色农业，涪陵区榨菜种植面积和产量均居全国首位。自1994年涪陵地区发现芥菜根肿病以来，该病害已成为芥菜的主要病害（高明权，彭洪江，王旭，等。涪陵芥菜根肿危害及产量损失测定。植物保护， 2002, 28

(6): 31-33; 肖重刚, 郭向华, 韩海波, 等. 涪陵芥菜根肿的鉴定及主要特征. 西南农业大学学报, 2002, 24(4): 539- 541)，涪陵地区芥菜连作期为10-20年，部分地块根肿病发病很严重，荒地多，对可持续发展影响很大。发展芥菜产业，增加农民收入。

它在农业中的应用越来越广泛。国内外一些厂家生产了光合细菌和菌肥，并已投放市场。海军上将大有发展前景(王秋菊. 植物光合细菌的研究现状与展望[J]. 黑龙江八一农业大学学报, 2006, 18(5): 25-29) ο

除此之外，光合细菌能促进有益微生物的增殖，具有抑制病原菌的能力，还能有效降解土壤中残留农药、H2S、过量氨氮等，是无污染的好土壤，无公害土壤净化调节剂（王强.光合细菌综合利用技术[J].国防科技信息1997年第4期（4):79-80)。目前光合细菌有已用于大豆、水稻、玉米等作物，已在生产中应用，但光合细菌在芥菜生产及抗病中的应用尚未见报道。

【发明内容】

针对现有技术存在的上述不足，本发明要解决的技术问题是：提供光合细菌在防治根肿病中的应用，降低根肿病的发病率，成菜率显着提高，提供了一种茎节根肿病防治剂，拓宽了光合细菌的应用范围。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：光合细菌在根肿病防治中的应用，光合细菌为红假单胞菌。

[0018] 进一步地，所述光合细菌在具体施药时用水与1〜2×18 cfu/mL的菌悬液混合，在芥菜苗移栽田间栽培前，将芥菜苗截短处理，根据每100mL菌悬液处理50～100株芥菜苗的方法，对切根的芥菜苗进行浸根处理30～60min。

一种芥菜根肿病防治剂，其成分包括红假单胞菌沼泽光合菌，所述红假单胞菌沼泽光合菌作为防治根肿病的主要活性成分。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、本发明通过实验验证光合细菌具有防治芥菜根肿病的作用，并针对具体应用研究最佳使用方法。采用本发明的具体施用方法处理幼苗，可使光合细菌与发根假单胞菌竞争寄生位点，利用光合细菌的分泌物杀灭假单胞菌。微生物数量的增加抑制了根肿病的生长，从而最终可以将种植的植物数量从23株增加到32.7株，种植率提高16.5%。根肿病 病害指数从77.5%下降到50.4%，病害指数下降27.1%，根肿病的控制率达到35%，这是一个意想不到的成果。技术效果。

2、在本发明验证光合细菌具有防治根肿病的基础上，本发明还提供了一种根肿防治剂，在该防治剂中。以沼泽红假单胞菌光合细菌为主要防治活性成分，还可加入其他营养成分。本发明经研究发现，根肿病防治剂中光合细菌浓度为2×18 cfu/mL时，可防治根肿病。防治效果最好，防治率可达35%。

3、本发明拓宽了光合细菌的应用范围，为防治根肿病提供了新的解决方案，该防治根肿病的方法成本低，操作方便，具有良好的市场应用前景。

【图纸说明】

图1为沼泽红假单胞菌接种后茎瘤芥的形成率；

图2是接种红假单胞菌后根肿病的病害指数分析。

【详细方法】

[0013] 下面结合具体实施例和附图对本发明作进一步详细说明。该示例是在本发明的技术的前提下实施的。现通过具体实施方式和具体操作过程来说明本发明的创造性，但本发明的保护范围不限于以下实施例。

实施例1 沼泽红假单胞菌菌株及培养

沼泽红假单胞菌(is)编号：I.2176，购自中国通用微生物菌种保藏管理中心。沼泽红假单胞菌培养基采用0925培养基（中国通用微生物菌种保藏管理中心提供），配方如下：

0925培养基（成分及终浓度）：磷酸二氢钾1.00g/L、氯化钙0.lg/L、碳酸氢钠3.00g/L、乙酸钠1. 00g/L，氯化镁0.5g/L，氯化铵1.00g/L，氯化钠1.0g/L，微量元素溶液1.00ml/L，维生素溶液I.0ml/L，琥珀酸钠1.00g/L足菌肿，酵母浸膏1.50g/L，蛋白胨0.5g/L，pH6.8。

其中，微量元素溶液的组成及终浓度为：四水氯化铁1.8g/L、六水氯化钴0.25g/L、六水氯化镍0.01g/ L、二水氯化铜0.01 g/L、四水氯化锰0.70 g/L、氯化锌0.10 g/L、二水钼酸钠0.03 g /L, 五水钠钠0.01 g/L ο

维生素溶液的组成及终浓度如下：生物素0.10g/L，烟酸0.35g/L，盐酸硫胺素

0.3 g/L，对氨基苯甲酸0.20 g/L，泛酸钙0.10 g/L，维生素B12 0.05 g/L。

实施例2接种方法

选择具有严重根肿病的地块。以涪陵区常用品种永安小叶为试验品种。移栽时将芥菜苗的根部剪掉，悬浮100mL红假单胞菌沼泽。液体（1×10 Cfu.mL—0加水至500 mL混匀（终浓度2×18 cfu/mL），60次切根处理后的幼苗浸根，浸泡30 min，重复3次平行操作试验：以清水为空白对照，地块随机布置，管理同一般田间，采收期调查病株率、病害指数及成菜数分别在治疗区和对照区，

实施例3疾病统计

1、统计方法：

根肿病严重程度为5级，其标准为（高明权，2012)：

O级：健康植物。

1级：侧根病害，瘤体小而少，白色，对植物生长无影响或影响轻微，减产0.5%。

2级：瘤主要在主根中部、上、下侧根，或侧根瘤大而多，白色或米色，对植物生长有一定影响，但地上部分无明显症状和产量损失 6？20%。

3级：主根瘤大变黑，表面粗糙开裂，有少量侧根，地上部分生长受阻，中心叶呈深绿色，日光下轻度萎蔫，产量损失为21-35%。

4级：主根瘤开裂或腐烂变黑，侧根几乎没有，地上部分生长严重受阻，株型矮小，叶色深绿色，菜头小而粗皮筋多，在阳光下，全株严重萎蔫，易拔起，减产（不含实际收获值的病株）36%以上。

病害指数=Σ（各级病株数×本病等级值）/（调查总株数×最高等级值）×100茎瘤芥菜成虫标准：茎瘤大于150g为成虫标准蔬菜，低 如果是 150g，则不算是一道菜。

2、根据上述统计方法，对实施例2浸渍处理后大田栽培的芥菜进行测定处理，分析结果如下：

2.1、茎瘤芥数分析：

将沼泽红假单胞菌接种到田间种植的杜鹃花苗中，收获时统计杜鹃花的数量。结果如图1所示：接种沼泽红假单胞菌的蔬菜种植数量为32.7株，蔬菜生长率为54.5%，明显高于接种沼泽红假单胞菌的蔬菜。控制。种植蔬菜数量为23，产量为38%，使芥菜产量从38%提高到54.5%，证明沼泽红假单胞菌对种植蔬菜数量有影响。杜鹃花芥末。增加 16.5%。

2.2、茎结节芥子根病指数分析：

将沼泽红假单胞菌接种到田间种植的芥菜苗中，收获前统计根肿病的发病指数。结果见图2：接种沼泽红假单胞菌的茎节根肿病发病指数为50.4%，明显低于对照77.@的根肿病发病指数。 >5%，根肿病指数降低27.1%，根肿控制率为35%。

实施例4结节性芥菜根肿病防治剂以下提供三种芥菜根肿病防治剂的配方：

1、根肿病防治剂为液体，使用红假单胞菌沼泽（根肿病防治剂中浓度为2X108 cfu/mL）作为根肿病防治剂主要活性成分还包括生物素0.20 g/L，烟酸

0.70 g/L，盐酸硫胺素0.45 g/L，对氨基苯甲酸0.30 g/L，泛酸钙0.20 g/L，维生素BI 20.10g/L0

2、根肿病防治剂是一种液体，以红假单胞菌沼泽（根肿病防治剂中的浓度为1×10 Cfu/mL）作为根肿病防治剂。根肿病的主要活性成分还包括生物素0.10 g/L，烟酸0.35 8/1，盐酸硫胺素0.3 g/L，对氨基酸苯甲酸0.20 8/1，钙泛酸0.10 g/L，维生素B12

0.05 克/升。

3、茎节芥菜根肿病防治剂足菌肿，是一种液体，以红假单胞菌沼泽（根肿病防治剂中浓度为1.5×10 cfu/mL）为主要有效成分防治治疗根肿，还包括生物素0.15 g/L、烟酸0.53 g/L、盐酸硫胺素0.45 g/L、对氨基苯甲酸7.7@ >30 g/L，泛酸钙0.15 g/L，维生素B12

0.08 克/升。

[0029] 采用上述芥菜病害防治剂对芥菜苗木进行浸根处理，均可使芥菜大田种植率提高，结核病指数降低。

最后需要说明的是，以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，并不用于限制。尽管已经结合优选实施例对本发明进行了详细描述，但是本领域普通技术人员应当在不脱离本发明技术方案的精神和范围内对技术方案进行修改或者等效替换，所有这些都应包含在本发明的权利要求的范围内。

【至尊物品】

1.光合细菌在防治根肿病中的应用，其特征在于光合细菌为沼泽红假单胞菌。＜@2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述光合细菌在混凝土施用时用水与1~2×18 cfu/mL的菌悬液混合，移栽到芥菜苗中至前田间栽培，将芥菜根苗剪掉，按照每10mL菌悬液处理10～20株芥菜苗的方法，将剪下的芥菜苗浸泡30～60分钟。分钟。＜@3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述光合细菌在具体施药时与水混合成2×108 cfu/mL的菌悬液，在芥菜苗移栽田间栽培前，将芥菜苗的根部剪断，按处理方法12处理。芥菜苗每10 mL菌悬液，切根后浸入芥菜苗根部30 min。4.一种防治根肿病的药剂，其特征在于其成分包括红假单胞菌沼泽光合细菌，而红假单胞菌沼泽光合细菌是防治根肿病的主要活性成分。＜@5.根据权利要求4所述的根肿病治疗剂，其特征在于，所述的沼泽红假单胞菌光合细菌在根肿病防治剂中的浓度为1? 2 X 18 cfu/毫升。6.根据权利要求5所述的根肿病防治剂，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌光合细菌在根肿病防治剂中的浓度为2×18 cfu/mL . 7.根据权利要求4，其特征在于，在所述的根肿防治剂的终浓度中还包括以下组分：0.10?0. 20 g/L 生物素，0.30~0.70 g/L 烟酸，0.30~0.50 g/L 盐酸硫胺素，0.2 （男）。

【文件号码】/

【公示日期】2016年8月24日

【申请日期】2016年5月10日

【发明人】王殿东、潘丽梅、田美子、王旭毅、李常满、张超、刘欢、杨霞、杨银平

【申请人】长江师范大学